操作elisa檢測試劑盒之前須掌握的一些要點
elisa檢測試劑盒的正確操作非常重要。以下是操作elisa檢測試劑盒之前須掌握的一些要點，希望對于剛剛進入實驗室的新手能夠有所幫助。
樣本的準備：盡量使用新鮮樣本，不使用有溶血，被細菌污染、標本保存時間過長和標本凝固不全的樣本。ELISA檢測宜采集新鮮標本，如不能立即測定，5天之內應4℃保存，對于1周后檢測的樣本應低溫凍存；做好分裝，長時間凍存的樣本避免反復凍融。
不同批次的試劑不要混用，檢查各組分的有效期。
預包被的酶標板條和各試劑組份需要室溫平衡30 min以上，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需溫度，預防后續實驗中由于孵育溫度或是時間不夠充分，而將一些弱陽性樣本不能檢出。
待測樣本加樣：待檢樣本過多時，建議分批操作；需要稀釋的樣本提前做好稀釋，注意選對合適稀釋液；控制好加樣時間，避免加樣費時過長造成誤差；注意加樣角度，垂直加入孔底，不要接觸孔壁, 做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
溫育和洗板：溫育時間和溫度一般根據試劑盒的說明書進行選擇。溫育時可以采用水浴或者濕盒孵育,避免“邊緣效應”。①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢。
顯色：市售elisa檢測試劑盒，一般是以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的顯色液，反應條件為37℃或室溫反應15～30 min。顯色反應需要避光。
