人ELISA檢測(cè)試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。如血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。今天，我們主要講解人ELISA檢測(cè)試劑盒的正確操作步驟：

    1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。

    3、待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL。

    4、隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

    6、所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

    7、所有孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

    注意事項(xiàng)：人ELISA檢測(cè)試劑盒在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用；實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存；濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，zui終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度；嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。