古朵生物：如何合理地選擇稀釋劑？
應用高效液相色譜檢測時，流動相的選擇十分重要，因此稀釋劑的選擇就成為重中之重。根據(jù)高效液相色譜檢測的不同要求，可以選擇不同的類型的稀釋劑。而選擇時的LC-MS級這一指標到底有何意義?本文對此予以了詳盡的解答。
眾所zhou知，在高效液相色譜檢測中要使用高純度稀釋劑作為流動相，在此有不同純度指標的稀釋劑可供選用，例如HPLC級稀釋劑、梯度級稀釋劑以及LC-MS級稀釋劑。在色譜分析中，應用不同稀釋劑的質量和稀釋劑的純度之間有什么關系?稀釋劑的質量為何要與檢測任務保持匹配?
稀釋劑的質量表示的是：它們是由同一種原料生產的，理論上只有微量雜質(根據(jù)不同的產品：99.8%~99.9%)。但這微量的雜質卻會在色譜分析中因不同的檢測方法由被測樣本而帶來變化，此時的純稀釋劑已經(jīng)不是原來意義上的“純稀釋劑”了。下面，我們將舉例說明稀釋劑質量的三個等級，以及使用合適質量稀釋劑的意義。
HPLC級純度
HPLC純度主要是從利用紫外線探測儀或熒光探測儀進行等度分離來描繪的稀釋劑質量。這種純度的稀釋劑以高純度、高穿透性、低熒光以及低揮發(fā)殘留物和低酸堿性而著稱。
這種稀釋劑能承受特殊的清潔過濾處理，以便盡可能除去干擾物質。這樣一來，由雜質引起的干擾和影響也都降低到了di，還能夠降低色譜分離的背景噪音。在完成過濾后，它們將按照紫外線探測和熒光探測的方法在高效液相光譜儀中進行測試。
經(jīng)質量監(jiān)控可以保證：用戶可以得到始終如一的稀釋劑質量，以確保高效液相光譜分析的高重復性。
梯度級純度
在高效液相色譜分離中，雜質的色譜法分離除了等度分離外還常常采用梯度清洗方法。在梯度清洗過程中液相的組成成分也在發(fā)生變化，例如在反相色譜中有機物含量增加。這對于不適合按照梯度分離法配制的稀釋劑來講會明顯提高紫外線探測時的基線、對檢測方法的靈敏性的影響。為了能夠佳利用Gradient純度的稀釋劑進行色譜分析，就必須對Gradient純度的稀釋劑進一步清潔。除了有利用紫外線和熒光進行探測的性能之外，還要對其梯度分離特性進行核查，從而保證Gradient純度的稀釋劑在一個批次的檢驗中質量穩(wěn)定。
LC-MS級純度
隨著實驗室引進了超高效液相色譜質譜聯(lián)用系統(tǒng)，由于其具有較高的靈敏度，也對稀釋劑提出了一些新的要求。因此，在質譜分析中應用的焦點，主要是針對低離子背景和高離子化效率。這樣，稀釋劑就要進行相應的凈化處理，而為關鍵的就是要清除微量元素、有機物質成分和(金屬)離子。因為它們能夠帶來很高的背景噪音，還會在內收過程中將被分析物質收進來，從而明顯降低檢測的靈敏度。在質量監(jiān)控時，將對利血平(m/z
609.49)的測試作為稀釋劑質量監(jiān)控的標準。
在測試過的質量范圍內只有很小的背景噪音，沒有因雜質帶來的干擾信號。由于LC-MS純度的稀釋劑有很高的純凈度，因此也非常適合在超高效液相色譜分析中使用。由于其能保證超高效液相分析柱有較長的使用壽命，因此也對其在紫外和熒光探測中的適應性進行核查。
小結
不同質量的稀釋劑都有其存在的理由，實驗人員進行分析工作時應根據(jù)需求選取適當?shù)南♂寗┦?，只有這樣，才能確保批次的色譜分析得到準確、可重復的檢測結果。
高效液相色譜分析技術中的純度
除了HPLC級、梯度級和LC-MS級純度之外，有些生產廠家還使用了介于梯度級和LC-MS級之間的稀釋劑純度，使用低純度稀釋劑雖然可行但卻容易帶來一定的風險。由于從生產廠方?jīng)]有zhi定高純度質量監(jiān)控的方法，色譜分析結果的正確性和重復精度都無法得到保障，每一新批次的色譜分析都會因高背景噪音或者干擾峰而得到令人吃驚的結果。
