古朵闡述：細胞分離液的使用、優點及注意事項
古朵闡述：細胞分離液的使用、優點及注意事項
細胞分離液是一種經過聚y烯c咯烷酮處理過的硅膠顆粒，經過高速離心后可形成連續密度梯度，由于Percoll擴散常數低，所形成的梯度十分穩定。Percoll細胞分離液采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200～1000g)于數分至數十分鐘內達到滿意的細胞分離結果。此外，Percoll細胞分離液不穿透生物膜，對細胞害，因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒，還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。常用于分離和傳話植物原生質體、核、葉綠體、和線粒體。
細胞分離液的配置與使用：
1、不同濃度(密度)Percoll分離液的制備: 先用9份分離液與1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓，然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
2、不連續密度梯度Percoll層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤，除去多余血清，這種預處理可使逐層疊加的液平穩沿管壁流下，使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置，有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時，可將Percoll液放入注射器中，小針頭斜面緊貼管壁，任其自然慢慢流下。
3、裝樣：樣品體積和細胞濃度根據不同細胞而異，一般加樣體積不宜過大，細胞濃度也不可過高，否則會影響細胞的分離和回收。
4、離心：一般采用離心力為400g，時間20～25min。由于多層Percoll之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩。
5、取樣：當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時，可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經2次洗滌后可供培養或檢測用。
細胞分離液的優點：
滲透性低、不穿透細胞、密度高、害，是目前較理想的介質。Percoll密度梯度離心已被多次成功地用于動物細胞及其細胞器的分離，純化了包括人血液細胞、骨髓細胞、紅血球細胞、白血球細胞、淋巴細胞、肝細胞等在內的十余種動物細胞。
細胞分離液注意事項：
1、細胞分離液在儲存及孵育過程中避免將實際保留在強光中。
2、試劑瓶蓋需蓋緊，防止蒸發和污染。
細胞分離液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。
