大鼠谷胱甘肽S轉移酶P(GSTP1)ELISA KIT的應用
大鼠谷胱甘肽S轉移酶P(GSTP1)ELISA KIT的應用
大鼠谷胱甘肽S轉移酶P(GSTP1)ELISA KIT用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠谷胱甘肽S轉移酶P1(GSTP1)的含量。
實驗原理：
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠谷胱甘肽S轉移酶P1(GSTP1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠谷胱甘肽S轉移酶P1(GSTP1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。
谷胱甘肽S-轉移酶是谷胱甘肽結合反應的關鍵酶，催化谷胱甘肽結合反應的起始步驟，主要存在于胞液中。
操作步驟：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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