古朵生物：elisa過程中有哪些注意事項
古朵生物：elisa過程中有哪些注意事項
ELISA實驗通用規則
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%.可用水和電子天平進行確定.希望有好有專業人員進行矯正.
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支.吸取不同的液體后,要換槍頭.即使是吸取標準品時.
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果穩定.
4、實驗時,要使底物避光保存.
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確.
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差.
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去.
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體.也可以用酶標儀的晃動功能.
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發.
10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗加徹底.沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干.
11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液.加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存.
12、底物是光敏感的,要在臨用前現配.
13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上.
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸.
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結果.
16、溫浴時間應遵守試劑盒規定.
17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性.
18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證.
二、下面所提到的是針對我公司的ELISA產品會出現的問題及解決辦法
1.加入反應終止液后,沒有吸光值或吸光值偏低.
a.原因：未加入酶標記物.
解決辦法：請按照操作步驟進行.
b.原因：試劑盒內容物未能充分回.
解決辦法：確定試劑盒內容物回溫后再進行操作.
c.原因：室溫太低.
解決辦法：若室溫太低(25℃).
解決辦法：若無法降低室內溫度,請適當縮短步驟4的溫育時間.
b.原因：底物溶液受到污染.
解決辦法：若發現底物溶液已呈現淡藍色,請不要再使用.
c.原因：反應時間超過太久.
解決辦法：請控制反應時間.
d.原因：酶標記物污染了盒內其它試劑.
解決辦法：使用過的吸頭應立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應立即清洗干凈.(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無殘留)
4.陰性標準品的吸光值低于陽性標準品的吸光值.
a.原因：微孔中的試劑未能充分混合.
解決辦法：試劑加完后,需輕敲盤四周使其充分混合均勻.
b.原因：洗板過程發生問題(同2-f.).
解決辦法：請參考2-f.
c.原因：添加樣品或酶標記物的量不一致.
解決辦法：請參考2-d.
ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。
