實驗室制備培養(yǎng)基的基本操作方法和注意事項

  一，玻璃器皿的清洗

  在制備培養(yǎng)基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管，三角瓶，培養(yǎng)皿，燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況，經過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進行包裝，經過滅菌等準備就緒后，才能使用。

  1，新購的玻璃器皿

  除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于1～2%的工業(yè)鹽酸中數小時，使游離的堿性物質除去，再以流水沖凈。對容量較大的器皿，如大燒瓶，量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸，數分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。

  2，用過的玻璃器皿

  凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時沖洗，吸取過化學試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經過適當消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿，可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸，其作用是將有機物氧化成可溶性物質，以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用，使用時應特別小心，避免濺到衣服，身體和其他物品上。

  二，在實驗室中配制的適合微生物生長繁殖或累積代謝產物的任何營養(yǎng)基質，都叫做培養(yǎng)基(Media)。由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同，培養(yǎng)目的和檢測需要不同，可根據某種標準，劃分為若干類型。

  1，根據組成物質的化學成分是否完全了解來區(qū)分：

  天然培養(yǎng)基是指利用各種動，植物或微生物的原料，其成分難以確切知道。主要原料有：牛肉膏，麥芽汁，蛋白胨，酵母膏，玉米粉，麩皮，各種餅粉，馬鈴薯，牛奶，血清等。用這些物質配成雖然不能確切知道它的化學成分，但一般來講，營養(yǎng)是比較豐富的，微生物生長旺盛，而且來源廣泛，配制方便，所以較為常用，尤其適合于配制實驗室常用的培養(yǎng)基。這一類產品穩(wěn)定性常受生產廠或批號等因素的影響。

  合成培養(yǎng)基是一類化學成分和數量完全知道的peiyangji，它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。這類產品化學成分，重復性強，但價格昂貴，而微生物又生長緩慢，所以它只適用于做一些科學研究，例如營養(yǎng)，代謝的研究。

  c.在合成培養(yǎng)基中加入某種或幾種天然成分;或者在天然培養(yǎng)基中加入一種或幾種已知成分的化學藥品即成半合成培養(yǎng)基。這一類產品在生產實踐和實驗室中使用多。

  2，根據物理狀態(tài)來區(qū)分：

  a.液體培養(yǎng)基所配制的是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物，營養(yǎng)成分分布均勻，易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。

  b.在液體中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質有瓊脂，明膠，硅膠等，以瓊脂為常用。在實驗室中，它被用作微生物的分離，鑒定，檢驗雜菌，計數，保藏，生物測定等。

  c.如果把少量的凝固劑加入到液體中，就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例，它的用量在0.2至1%之間。有時可用來觀察微生物的動力，有時用來保藏菌種。

  3，根據用途來區(qū)分：

  a.在其中加入某種物質以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養(yǎng)基，如鏈霉素，氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素，灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長;結晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。

  b.為了分離我們所需要的微生物，在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種被稱為增殖培養(yǎng)基，常用于菌種篩選和選擇增菌中。

  c.在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品，使難以區(qū)分的微生物經培養(yǎng)后呈現出明顯差別，因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的被稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍就是常用的一種。

  有些是具有選擇和鑒別雙重作用。例如食品檢驗中常用的麥康凱培養(yǎng)基是一例。它含有膽鹽，乳糖和中性紅。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細菌的作用選擇性，乳糖和中性紅指示劑能幫助區(qū)別乳糖發(fā)酵腸道菌如大腸桿菌和不能發(fā)酵乳糖的腸道致病菌如沙門氏菌和志賀氏菌。

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