古朵快訊：減少ELISA試劑盒實驗誤差的小妙招
減少ELISA試劑盒實驗誤差的小妙招
ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。該法適于測定細胞培養上清、血清、血漿及織液中的樣本，干擾小可以測到每毫升納克水平的細胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體。
②酶標記的抗原或抗體。
③酶作用的底物。
根據ELISA試劑盒的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法。
(二)雙位點一步法。
(三)間接法測抗體。
(四)競爭法。
(五)捕獲法測IgM抗體。
(六)應用親和素和生物素。
ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗. 在這種方法中, 通常標準配體是固定的, 通過加入溶液相受體或蛋白質來使之成鍵. 通過加入與受體特異性反應的抗體來定量成鍵的受體, 而且初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測量. 第二種抗體能識別抗體的末端, 在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發生反應, 從而使溶液顯色。
操作注意事項
1. ELISA試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。
3. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。4. 所有液體組分使用前充分搖勻。
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