實(shí)驗(yàn)原理：ELISA實(shí)驗(yàn)之“邊緣效應(yīng)”
實(shí)驗(yàn)原理：ELISA實(shí)驗(yàn)之“邊緣效應(yīng)”
在運(yùn)用elisa試劑盒96孔板的試驗(yàn)測(cè)定的時(shí)候，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研究認(rèn)證真實(shí)溫育中的熱力學(xué)梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在試驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中，將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學(xué)梯度。因而運(yùn)用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃)，就可以很容易地掃除“邊緣效應(yīng)"，而且可進(jìn)步測(cè)定的重復(fù)性。
ELISA試劑盒還有就是在試驗(yàn)中，必定有運(yùn)用微量加樣器參加樣本的步驟。提示留意：加樣不行太快，要防止加在孔壁上部，不行濺出和發(fā)生氣泡。ELISA試劑盒太快的話無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易致使非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)附近孔發(fā)生污染。出現(xiàn)氣泡則反響液界面有區(qū)別。所以，有時(shí)分一份標(biāo)本用一樣的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性，下次測(cè)定為陰性，通常就是上述加樣及試劑的過(guò)錯(cuò)所造成的。
ELISA試劑盒運(yùn)用時(shí)必定要根據(jù)自個(gè)的試驗(yàn)需求采購(gòu)專業(yè)的試劑盒，如果不是專用試劑盒，或許能提出RNA，但不能保證其質(zhì)量以及完整性。
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