小鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試 劑盒需自備的設(shè)備及試劑：
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2.單道或多道微量加液器及吸頭
3.稀釋樣品的EP管
4.蒸餾水或去離子水
5.吸水紙
6.盛放洗液的容器



小鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒代測(cè)操作步驟：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。



小鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA 試劑盒原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標(biāo)本的處理：
（1）細(xì)胞培養(yǎng)上清液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測(cè)。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
（2）腦脊液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測(cè)。推薦稀釋濃度是5倍。
（3）血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲(chǔ)存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液126倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測(cè)，按照說明書方法檢測(cè)。



小鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒代測(cè)質(zhì)量管理要求：
1、檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理 ELISA試劑盒（ELISA試劑盒原理）。
2、熟悉檢測(cè)技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)。
3、熟悉檢測(cè)試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成。
4、熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。
5、某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。



小鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒部分相關(guān)產(chǎn)品如下：
大鼠半乳糖凝集素8(Gal8)ELISA試劑盒
魚可溶性法尼醇X受體(SFXR)ELISA試劑盒
雞防御素β-4a(DEFβ-4a)ELISA試劑盒
犬膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒
魚Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒
小鼠白介素25(IL25)ELISA試劑盒
植物乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA試劑盒
人抗II型膠原自身抗體(Anti-CIIAb)ELISA試劑盒
豬可溶性白細(xì)胞介素2A受體ELISA試劑盒
豬II型前膠原氨基端原肽(PIINP)ELISA試劑盒
猴促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)ELISA試劑盒
豬可溶性糖蛋白130(Sgp130)ELISA試劑盒
牛血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)ELISA試劑盒
大鼠波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒
雞ⅡA組磷脂酶A2(血小板,滑膜液)(PLA2G2A)ELISA試劑盒
大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒
大鼠黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒