48t/96t 巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒
簡單介紹
48t/96t 巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒的詳細介紹
中文名:人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒
別名:人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA kit
供應商:上海古朵
規格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
庫存狀態:現貨供應
檢測方法:酶免法/酶聯免疫法(ELISA)注:本產品僅供科研使用
運輸方式:現貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)水平。用純化的人基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入基質金屬蛋白酶-13(MMP-13),再與HRP標記的基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)濃度。
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(640μg/L) 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個

標本要求:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 操作步驟:
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
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