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48t/96t 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒
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48t/96t 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒

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產品名稱:48t/96t 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒

產品型號:48t/96t

產品廠商:上海古朵生物科技有限公司

簡單介紹

人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒操作步驟,產品用途:用于測定血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。

48t/96t 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒的詳細介紹

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中文名:人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒
英文名稱:Human Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT
供應商:上海古朵
規格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
產品用途:用于測定血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。



人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒操作步驟
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50?l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40?l,然后再加待測樣品10?l(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50?l,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50?l,再加入顯色劑B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。


◆可逆性:
抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態平衡,其反應式為:
Ag+Ab→Ag·Ab
抗體的親和力(affinity)是抗原抗體間的固有結合力,可以用平衡常數K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
◆適比例:
在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復合物(沉淀)的量。曲線的高峰部分是抗原抗體比例合適的范圍,稱為等價帶。在等價帶前后分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。如果抗原或抗體度過剩,則無沉淀物形成,在免疫測定中稱為帶現象。抗體過量稱為前帶,抗原地過量稱為后帶。在用免疫學方法測定抗原時,應使反應系統中有足夠的抗體量,否則測得的量會小于實際含量,甚至出現假陰性。


人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒操作步驟 注意事項:
1,封閉中的蛋白會非特異性將ELISA板子中沒有結合包被物的位點封閉掉,這樣之后加入的抗原或者抗體就不會再和板子發生非特異性的結合.使ELISA的結果更加的準確品
2,固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
3,包被抗體的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,蛋白質包被的適濃度需進行滴定然后觀察陽性標本的OD值。
4,酶標記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進行初步效價的滴定,然后再固定其它條件,后在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
5, ELISA試劑盒酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,如 TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。



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