人抗副流感病毒IgM抗體ELISA試劑盒操作說明，檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

上海古朵生物科技詳細為您介紹人抗副流感病毒IgM抗體ELISA試劑盒操作說明，用途，規(guī)格，保質(zhì)期，價格，品牌等詳情，本司提供elisa試劑盒代測服務(wù)，一周內(nèi)出結(jié)果，ELISA種屬有：大鼠ELISA檢測試劑盒，小鼠ELISA檢測試劑盒，人ELISA試劑盒，馬ELISA檢測試劑盒，羊ELISA檢測試劑盒，猴ELISA試劑盒，豬ELISA試劑盒，狗ELISA檢測試劑盒，植物ELISA試劑盒，猴ELISA試劑盒，其他動試劑盒，歡迎來電訂購！


中文名：人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。


人抗副流感病毒IgM抗體ELISA試劑盒操作說明 試劑及試劑配制：
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原： IgG
②酶標抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3＇,5,5＇-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液：2mol/L H2SO4



人抗副流感病毒IgM抗體ELISA試劑盒操作說明 操作步驟：
①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。
③洗滌：用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。
⑥加二抗（酶標抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次，
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍色。
⑨終止反應(yīng)、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標儀測定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。