產(chǎn)品名稱：游離膽固醇檢測試劑盒(COD-PAP雙試劑比色法)規(guī)格：100T供應(yīng)商:古朵生物分類：生化檢測儲存條件:4℃,避光,6個月產(chǎn)品用途：用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的游離膽固醇含量定量測定。

產(chǎn)品名稱：游離膽固醇(FC)檢測試劑盒(COD-PAP雙試劑比色法)
規(guī)格：100T
供應(yīng)商:古朵生物
分類：生化檢測
儲存條件:4℃,避光,6個月
產(chǎn)品用途：用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的游離膽固醇含量定量測定。
注意事項：又稱膽固醇氧化酶法或膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等,血液中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,2/3為與脂肪酸結(jié)合的膽固醇酯,后者被CEH水解為游離膽固醇,后者被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮,并產(chǎn)生過氧化氫,再經(jīng)過氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應(yīng),生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應(yīng))。分光光度計在500~520nm處進(jìn)行比色測定。


游離膽固醇檢測試劑盒(COD-PAP雙試劑比色法)檢測方法：微量法
測定意義：植物酚類物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
測定原理：在堿性條件下，酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，在760nm處有特征吸收峰，測760nm處的吸光值，即可得樣品總酚含量。
需要的儀器，耗材:天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。


游離膽固醇檢測試劑盒(COD-PAP雙試劑比色法)操作注意事項：
1）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9）按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。


游離膽固醇檢測試劑盒(COD-PAP雙試劑比色法)特點：
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計用細(xì)胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.



樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。


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